| 品牌 | 其他品牌 | 貨號 | K61010 |
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| 供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業,制藥/生物制藥 |
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MagVigen™ Whole Blood, PBMC or Cell Genomic DNA Extraction Kit
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產品內容
- mag vigen DNA捕獲納米顆粒
- 裂解緩沖液
- 洗滌緩沖液
- 洗脫緩沖液
- 蛋白酶K溶液
需要但不包括的材料
- 磁性架(NVIGEN目錄號A20006)
- 異丙醇(分子生物學級)
- 乙醇(200度)
- 美國公共廣播公司
協議
注意:
- 制備清洗緩沖溶液:在每550 μl清洗緩沖儲備液中加入450 μl異丙醇，制成清洗緩沖液。
- 使用前充分渦旋珠子。
- 以下方案使用150 μl作為提取起始體積。對于其他體積，請按比例縮放每個步驟中使用的試劑。
- 將150 μl樣品轉移到1.5ml Eppendorf試管中。如果樣品量較少，加入PBS補足體積。對于全血樣品，即從60 μl或75 μl樣品開始，用等體積的PBS稀釋。
- 加入5 μl蛋白酶K溶液，加入150 μl細胞裂解緩沖液。輕輕混合均勻，并在55℃下孵育30分鐘
- 向裂解緩沖液中加入5μl MagVigen DNA捕獲納米顆粒。渦旋混合均勻。向裂解反應中加入300 μl異丙醇，渦旋混合。室溫下孵育20分鐘。
- 將樣本管放在磁性架上沉淀珠子，直到溶液澄清(約5分鐘)。慢慢取出并丟棄上清液。注意不要帶走任何珠子，盡可能多地移除溶液。
- 從磁鐵上取下樣本管，加入150 μl清洗緩沖液。通過移液或倒置混合。短暫旋轉，使溶液到達試管底部。在磁性架上沉淀珠子，直到溶液澄清(大約1-3分鐘)，然后去除上清液并丟棄。
- 添加150μl 80%乙醇(清洗2)，通過移液混合。短暫旋轉，使溶液到達試管底部。在磁性架上沉淀珠子，等到溶液澄清，去除上清液并丟棄。
- 重復步驟6，用80%乙醇再次清洗(清洗3)。
- 將樣本管放在磁性架上，風干顆粒約1分鐘。
- 向珠子中加入50 μl洗脫緩沖液，并充分混合。室溫下孵育1分鐘。
- 將樣本管放置在磁性支架上1-2分鐘。小心地從Eppendorf管底部收集洗出液，不要擾動沉淀。
- 重復步驟9和10進行另一次洗脫。洗出液含有提取的DNA。
注意: 對于要求高樣品清潔度的下游應用，將樣品放在磁鐵旁邊，以消除殘留珠子的可能性。
表1。每個步驟中使用的試劑體積。
| 名字 | 體積(微升) | 體積(微升) |
| 樣品(全血、PBMC層或分散在PBS中的細胞) | 120 | 150 |
| 蛋白酶K溶液 | 4 | 5 |
| 裂解緩沖液 | 120 | 150 |
| 磁珠 | 3.2 | 4 |
| 異丙醇 | 240 | 300 |
| 清洗緩沖液(清洗1) | 120 | 150 |
| 新鮮的80%乙醇(清洗2和3) | 120 x 2 | 150 x 2 |
| 洗脫緩沖液，2X | 40 x 2 | 50 x 2
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MagVigen™ Whole Blood, PBMC or Cell Genomic DNA Extraction Kit
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